Hướng dẫn pha stock hormone sinh trưởng thực vật.

Sự cần thiết của hormone cho ngành nuôi cấy mô thực vật là rất lớn. Hormone thực vật điều khiển quá trình sinh trưởng và phát triển của cây, hormone có thể kích thích quá trình sinh trưởng hoặc cũng có thể kìm hãm quá trình sinh trưởng của cây, tuỳ vào mục đích sử dụng. Thí dụ, hạt lúa đang nảy mầm thì hormone GA3 được tổng hợp và giải phóng bởi phôi sẽ phân tán đến lớp aleurone, tại đây chúng sẽ gây ra sự tổng hợp và tiết các ezyme thuỷ phân. Enzyme tài sẽ phân giải các chất dự trự cao phân tử thành phân tử nhỏ hơn để phôi sử dụng cho giai đoạn đầu; một thí dụ về kìm hãm sự phát triển: các chồi nách sẽ bị kiềm hãm tăng trưởng bởi auxin được tổng hợp ở đỉnh ngọn và được chuyển xuống dưới thân cây.

Xem giá các hormone nuôi cấy mô thực vật

Chuẩn bị pha chế môi trường và sử dụng

Để chuẩn bị dung dịch stock 1mg/1ml ta làm các bước sau: Cho 100mg của hormone thực vật vào 2-5ml dung môi để hoà tan hormone này, vào đổ 98 hoặc 95ml nước cất. Vì cuối cùng ta có 100ml dung dịch stock. Sau đó khuấy cho chúng tan thật đều và tiến hành trữ ở nhiệt độ như bên dưới bảng. Cuối cùng, sau khi ta được dung dịch stock pha sẵn thì mỗi lần pha ta lấy 1ml stock/L tương ứng với nồng độ chất là 1mg/L.

Thí dụ như: lượng hormone cần dùng là 2mg/L thì ta lấy ở stock là 2ml/L. Hoặc lưọng hormone cần dùng là 10mg/L thì ta lấy 10ml dung dịch stock/ 1 lít môi trường.

Bây giờ xem bảng bên dưới tương

Đối với Auxins

Tên sản phẩm	Mã sản phẩm	Molar Equivalence		Chuẩn bị dung dịch
		Mol. Wt.	µM for 1mg/L	Dung môi	Pha loãng	Bảo quản bột	Bảo quản dung dịch	Vô trùng*	Working Conc. (mg/L)
p-Chlorophenoxyacetic acid (4-CPA)	C0413	186.6	5.36	ethanol	—	Nhiệt độ phòng (RT)	2-8°C	CA	0.1-10.0
2,4-Dichlorophenoxyacetic acid	D7299	221	4.53	—	—	RT	2-8°C	CA	0.01-6.0
2,4-Dichlorophenoxyacetic acid Sodium salt	D6679	243	4.12	Nước cất	—	RT	2-8°C	CA	0.01-6.0
Indole-3-acetic acid Free acid (IAA)	I2886	175.2	5.71	EtOH/1N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	CA/F	0.01-3.0
Indole-3-acetic acid Sodium salt	I5148	197.2	5.07	Nước cất	Nước cất	2-8°C	-0°C	CA/F	0.01-3.0
Indole-3-acetic acid methyl ester	I9770	189.2	5.29	—	—	2-8°C	2-8°C	—	—
Indole-3-acetyl-L-aspartic acid	I9387	290.3	3.45	0.5N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	F	0.01-5.0
Indole-3-butyric acid (IBA)	I5386	203.2	4.90	EtOH/1N NaOH	Nước cất	2-8°C	-0°C	CA/F	0.1-10.0
Indole-3-butyric acid Potassium salt (K-IBA)	I7512	241.3	4.14	Nước cất	—	2-8°C	-0°C	CA/F	0.1-10.0
alpha-Naphthaleneacetic acid Free acid (NAA)	N0640	186.2	5.37	1N NaOH	Nước cất	RT	2-8°C	CA	0.1-10.0
beta-Naphthoxyacetic acid Free acid (NOA)	N3019	202.2	4.95	1N NaOH	Nước	RT	2-8°C	CA	0.1-10.0
Phenylacetic acid (PAA)	P6061	136.2	7.34	EtOH	—	RT	2-8°C	CA/F	0.1-50.0
Picloram	P5575	241.5	4.14	DMSO	—	RT	2-8°C	CA	0.01-10.0
2,4,5-Trichlorophenoxyacetic acid (2,4,5-T)	T5785	255.5	3.91	EtOH	—	RT	2-8°C	CA	0.01-5.0
2,3,5-Triiodobenzoic acid Free acid (TIBA)	T5910	499.8	2.00	1N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	F	0.05-5.0

Notes: CA là hấp chung với các thành phần môi trường khác được, F là hấp có chọn lọc, CA/F là có thể hấp chung với các thành phần môi trường khác nhưng có thể mất một số hoạt tính
.
Đối với Cytokinins

Tên sản phẩm	Mã sản phẩm	Molar Equivalence		Chuẩn bị dung dịch
		Mol. Wt.	µM for 1mg/L	Solvent	Diluent	Bảo quản bột	Bảo quản dung dịch	Vô trùng*	Working Conc. (mg/L)
Adenine Free base	A5665	135.1	7.40	1.0 HCl	Nước cất	RT	2-8°C	CA	50-250
Adenine hemisulfate Hemisulfate salt	A2545	184.2	5.43	Water	—	RT	2-8°C	CA	50-250
6-Benzylaminopurine (BA)	B3408	225.3	4.44	1N NaOH	Nước cất	RT	2-8°C	CA/F	0.1-5.0
6-Benzylaminopurine Hydrochloride	B5920	261.7	3.82	Nước cất	—	RT	2-8°C	CA/F	0.1-5.0
6-Benzylaminopurine (BA)	B3274	225.3	4.44	1N NaOH	Nước cất	RT	2-8°C	CA/F	0.1-5.0
N-Benzyl-9-(2-tetrahydropyranyl)adenine (BPA)	B2275	309.4	3.23	EtOH	—	-0°C	-0°C	CA/F	0.1-5.0
N-(2-Chloro-4-pyridyl)-N'-phenylurea (4-CPPU)	C2791	247.7	4.04	DMSO	—	2-8°C	2-8°C	F	0.001-1.0
6-(gamma,gamma-Dimethylallylamino)purine (2iP)	D7674	203.2	4.92	1N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	CA/F	1.0-30.0
6-(gamma,gamma-Dimethylallylamino)purine (2iP)	D5912	203.2	4.92	1N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	CA/F	1.0-30.0
1,3-Diphenylurea (DPU)	D7535	212.3	4.71	DMSO	—	RT	2-8°C	F	0.1-1.0
Kinetin	K0753	215.2	4.65	1N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	CA/F	0.1-5.0
Kinetin	K3378	215.2	4.65	1N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	CA/F	0.1-5.0
Kinetin	K3253	215.2	4.65	1N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	CA/F	0.1-5.0
Kinetin Hydrochloride	K1885	251.7	3.97	Nước cất	—	-0°C	-0°C	CA/F	0.1-5.0
1-Phenyl-3-(1,2,3-thiadiazol-5-yl)urea	P6186	220.2	4.54	DMSO	—	RT	2-8°C	CA/F	0.001-0.05
trans-Zeatin Free base	Z0876	219.2	4.56	1N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	CA/F	0.01-5.0
Zeatin	Z0164	219.2	4.56	1N NaOH	Nước cấtr	-0°C	-0°C	CA/F	0.01-5.0
trans-Zeatin Hydrochloride	Z2753	255.7	3.91	Nước cất	—	-0°C	-0°C	CA/F	0.01-5.0
trans-Zeatin riboside	Z3541	351.4	2.85	1N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	F	0.01-5.0

Notes: CA là hấp chung với các thành phần môi trường khác được, F là hấp có chọn lọc, CA/F là có thể hấp chung với các thành phần môi trường khác nhưng có thể mất một số hoạt tính

Các loại hormone khác

Tên sản phẩm	Mã sản phẩm	Molar Equivalence		Chuẩn bị dung dịch
		Mol. Wt.	µM for 1mg/L	Solvent	Diluent	Bảo quản bột	Bảo quản dung dịch	Vô trùng*	Working Conc. (mg/L)
(±)-cis,trans-Abscisic acid (ABA)	A1049	264.3	3.78	1N NaOH	Nước cất	-0°C	-0°C	CA/F	0.1-10.0
Ancymidol	A9431	256.3	3.90	DMSO	—	2-8°C	-0°C	CA/F	1.0-10.0
Chlorocholine chloride (CCC)	C4049	158.1	6.33	Nước cất	—	RT	2-8°C	F	up to 500
3,6-Dichloro-o-anisic acid (Dicamba)	D5417	221.0	4.52	EtOH/Water	—	2-8°C	2-8°C	F	0.01-10.0
Gibberellic acid (GA3)	G7645	346.4	2.89	EtOH	—	RT	2-8°C	CA/F	0.01-5.0
Gibberellic acid Potassium salt (K-GA3)	G1025	384.5	2.60		—	2-8°C	-0°C	CA/F	0.01-5.0
Gibberellin A4 Free acid (GA4)	G7276	332.4	3.01	EtOH	—	-0°C	-0°C	F	0.01-5.0
(±)-Jasmonic acid	J2500	210.3	4.76	EtOH	—	2-8°C	-0°C	F	0.01-100.0
Phloroglucinol	P1178	126.1	7.93	Nước cất	—	RT	2-8°C	CA/F	up to 162
N-(Phosphonomethyl)glycine (Glyphosate)	P9556	169.1	5.91	1N NaOH	Nước cất	RT	2-8°C	F	—
Succinic acid 2,2-dimethylhydrazide	S2022	160.2	6.24	Nước cất	—	2-8°C	2-8°C	CA/F	0.1-10.0

Notes: CA là hấp chung với các thành phần môi trường khác được, F là hấp có chọn lọc, CA/F là có thể hấp chung với các thành phần môi trường khác nhưng có thể mất một số hoạt tính

Nồng độ hormone Auxins hay sử dụng: Trong nuôi cấy mô thực vật thường sử dụng từ 0.01 đến 10mg/L. Khi thêm vào nồng độ thích hợp chúng sẽ kích thích tăng trưởng rễ, hình thành mô sẹo, tăng sinh phôi, kích thích sự trương giãn của tế bào. Nếu ở nồng độ quá cao thì sẽ gây phản ứng ngược lại, biến thành chất ức chế.

Nồng độ Cytokinins hay sử dụng: Trong nuôi cấy mô thực vật, chúng được sử dụng từ 0.1 đến 10mg/L. Khi sử dụng ở liều lượng thích hợp chúng sẽ kích thích hình thành chồi, ức chế hình thành rễ, hoạt hóa tổng hợp RNA và kích thích các hoạt động hình thành protein và enzyme.

Có thể bạn quan tâm: 
8. Nhân giống nhanh Hồng Môn bằng phương pháp nuôi cấy mô thực vật
9. Kháng sinh thực vật
10. Nuôi cấy mô cây hồ tiêu cho người mới bắt đầu
11. Sách về nuôi cấy mô thực vật
12. Môi trường nuôi cấy hoa lan từ hạt

Nguồn: SBC Scientific, Springer
Hotline: 0945677929
Email: info@sbc-vietnam.com