Môi trường PDA( Potato dextrose agar) hay PDB( potato dextrose broth) là môi trường rất thông dụng để nuôi các loại vi sinh và nấm. Các trang trại sản xuất meo nấm trước đây thường sử dụng môi trường PDA để nuôi meo nấm. Họ tự chế môi trường với các nguyên liệu như khoai tây 300g, đường dextrose 20g và agar 20g. Tất cả nguyên liệu này được nấu với 1 lít nước. Phương pháp chế biến thủ công được tiến hành tiếp tục như bên dưới, NHƯNG hiện tại các công ty với quy mô công nghiệp thành công đã chuyển sang PDA pha sẵn của SBC, môi trường PDA pha sẵn rất tiện lợi và chất lượng. Không cần phải tốn công chuẩn bị nguyên liệu và cân đo các tỷ lệ nguyên liệu thô như phương pháp thủ công, cũng không cần phải chuẩn lại độ pH....

Meo nấm cấp I:

- Rửa sạch và cắt nhỏ khoai tây thành những miếng vuông và nhỏ cỡ 1cm3 nấu chín lọc xác để lấy nước.
 

- Cho agar ( để chúng làm cứng môi trường sau khi để nguội) và đường dextrose vào nước khoai tây và khuấy cho tan đều.

- Lưu ý độ pH từ có thể từ 7-9.

- Môi trường sau khi đã được pha chế xong thì đem đi hấp tiệt trùng. Áp suất là 1 atm, nhiệt độ đạt chuẩn là 121oC. Nếu nồi hấp theo đúng tiêu chuẩn thì thời gian hấp là 15- 20 phút. Không nên để quá lâu, sẽ làm cháy đường trong môi trường PDA.

- Sau khi hấp tiệt trùng xong thì để nguội để cấy meo nấm vào môi trường. Môi trường có thể được chứa trong ống nghiệm hoặc đĩa petri. 

- Phòng để làm meo nấm phải sạch sẽ để bảo đảm chất lượng nấm không bị nhiễm khuẫn hoặc các tạp khác. 


Tơ nấm ở môi trường cấp I

Sau đây là bảng tóm gọn tỷ lệ của môi trường PDA

Potato infusion	200 gram
Dextrose	20 gram
Agar	20 gram
Nước cất	1 lit

.
Khi ta đã tiến hành nuôi meo nấm thành công với môi trường PDA, thì ta có thể chuyển meo nấm này sang một môi trường khác để chúng tiếp tục phát triển, bước cuối cùng là nuôi meo nấm cấp III.

Meo nấm cấp II: Meo nấm cấp I sau đó được cấy lên môi trường có chứa cellulose, có thể là cọng lúa hoặc thân cây mì. Chọn rơm lúa mùa có cọng dài, thích hợp để tơ phát triển, tuốt bỏ bớt lá, cắt khúc khoảng 12cm, chọn chừng 8-10 cọng dùng dây nylon tước nhỏ cột quấn chung quanh thành 1 bó nhỏ. Nếu là thân cây mì: Lựa thân cây mì già róc hết vỏ xanh, chặt khúc khoảng 12cm chẻ thành thanh nhỏ, róc bỏ ruột, phơi nắng cho thật khô. Bảo quản 1 thời gian ngắn không để lâu quá dễ bị mọt. 


Tơ nấm ở môi trường cấp II

+ Các nguyên liệu trên ( khoảng 1kg) được trộn với bột bắp 150g và cám 50g trước hết đem đi ngâm với vôi 1% để loại bỏ bớt vi khuẩn và các loại nấm mốc. 

+ Đem đi hấp tiệt trùng 1,5atm/ giờ.

+ Môi trường có chứa meo nấm trong đĩa petri hoặc ống nghiệm sẽ được cắt thành nhiều mảnh và đem cấy vào môi trường cấp II( có chứa rơm hoặc thân cây mì).

+ Tiếp theo ta đem đi ủ để chờ meo nấm phát triển thành sợi, thời gian chờ đợi khoảng 7-10 ngày, nhiệt độ tối ưu từ 30- 35oC.

+ Sau khi đã ủ xong, ta tiến hành tuyển chọn xem mẫu nào tốt, loại bỏ những mẫu xấu có nhiễm tạp những loại nấm khác hoặc bị nhiễm khuẩn.

Meo nấm cấp III: Meo nấm ở môi trường cấp II chuyển sang. Môi trường cấp III chủ yếu là rơm rạ, trấu, cám, cùi bắp và mạc cưa. Chú ý nguyên liệu không bị ẩm ướt và nấm mốc.


Tơ nấm ở môi trường cấp III

+ Rơm, rạ 1kg, cám 50g, bắp 150g, nước vôi 1%. Rơm rạ cắt ngắn 2-3cm phơi thật khô, trước khi làm meo ngâm nước vôi 1%, khoảng 2 giờ vớt ra để ráo nước đến khi đủ độ ẩm. Bắp,cám trộn nước vôi đủ độ ẩm trước khoảng 2 giờ. Trộn đều các nguyên liệu, dậm đạp cho mềm, xong cho vào chai hay bịch.